崔新琴1968年,参加工作。1978年,考入北京电影学院表演系师资班,毕业后留校任教；同年,与张金玲,赵凡合作出演的剧情电影《希望》上映。1979年1月25日,参演由尹一青执导的革命电影《灯》上映。1980年,与李岚等人联袂出演的革命电影《竹》上映；同年,参演姚寿康执导的爱情电影《播种幸福的人》上映。1981年,参演钱学恪,张昕执导的战争电影《百合花》上映。1982年,与马精武等人共同出演的剧情电影《我,你,他》上映。1986年,与蔡明,杨树泉主演的剧情电影《小月》上映。1985年,参演哈斯巴根执导的电视连续剧《失火的天堂》。1987年,与翟春华,张启德主演的抗战电影《到青山那边去》上映；同年,出演的现代电影《鸳鸯楼》上映。1991年,和巩立峰,富大龙共同出演的警匪电影《夏日历险》上映。1994年,与郑榕等人合作出演的剧情电影《谢觉哉办案》上映。1996年,获得北京电影学院优秀教师称号。1998年,与冯远征,张国立共同出演的传奇剧《琉璃厂传奇》播出。1999年,执导的话剧《北京人》在中央电视台“戏剧博览”播出。2003年1月1日,与李诚儒,王小毅共同出演的现代剧《刑警的故事》播出。2004年,获得“北京电影学院先进工作者”称号。2005年5月11日,参演的电视连续剧《银色年华》播出。2006年,获得“北京电影学院师德十佳先进个人”称号。崔新琴2011年,参演的话剧《烈焰》获得第2届全国戏剧文化奖“表演金奖”。2013年6月19日,出演的情感剧《烈焰》在河北卫视上星播出。2014年2月27日,搭档张嘉译,王海燕共同参演的都市剧《结婚的秘密》在天津文艺频道黄金档首播；12月16日,出演的都市情感剧《剧场》在辽宁都市频道首播。2015年5月3日,参演的都市家庭轻喜剧《虎妈猫爸》在东方卫视,天津卫视首播,她凭借该剧获得第6届澳门国际电视节最佳女配角奖；同年,获得第15届中国电影表演艺术学会金凤凰奖电影学会贡献奖。2016年11月7日,和张静初,张歆艺共同出演的爱情剧《咱们相爱吧》在湖南卫视金鹰独播剧场首播。2019年,与黄磊,闫妮共同出演的喜剧电影《狗眼看人心》上映。2020年,担任央视电影频道创办的“星辰大海青年演员优选计划”的评委。2021年2月8日,参演的当代都市剧《约定》在爱奇艺首播。
社会任职中国电影家协会会员。