刘真佑自小艺术天分突出;;中学时期的他经常登台演出。1994年应朋友之邀进入北京游乐园做现场短剧演出,半年后离开。刘真佑
1998年,拍摄由孙树培执导,琼瑶担任编剧的爱情喜剧电视剧《还珠格格》；同年,拍摄由黄健中执导,李诚儒,王茜,郑晓宁主演的电视剧《警坛风云》。2001年,拍摄由张黎执导,盛和煜,王冰,吕中主演的历史电视剧《走向共和》饰演端方后续在,《保镖》《上官婉儿》《黑血》,《延安颂》,《最后的骑兵》,《南少林》,《中华之剑》,《生死搭档》等戏中参演了很多大小不同的角色。2006年,参演冯小刚执导的电影《集结号》,饰演愤青干部,演技受到称赞。2007年,主演吴祖云导演的剧情片《太阳花开》饰演高建桥。2008年,与陈建斌,于和伟,倪大红联合主演由高希希执导执导古装历史战争电视剧《三国》中饰司马昭。2009年,主演由张翼平执导的电影《永州故事》在片中饰演盘存礼一角。后续出演了《金都一九四三》,《被雨淋湿的翅膀》,《蓝裙子》,《我在马路边捡到一元钱》,《杨成武强攻东团堡》,《血战陈庄》,电视剧《孔雀翎》,《米脂婆姨》等2013年,出演由张孝正执导,胡杏儿,李晟,邱泽主演的电视剧《红酒俏佳人》饰演施震。2014年,出演由刘二威执导,陈乔恩,张译,蔡明主演的都市电视剧《嫁个老公过日子》饰演阮总。2015年,出演由麦贯之执导陈键锋,杜若溪主演的年代悬疑剧《同谋者》饰演宋凯文。2018年出演由钟澍佳执导,窦骁,古力娜扎主演的都市职场剧《十年三月三十日》饰演霸气干练的文总。同年,出演由李子俊执导,大鹏,林家栋领衔主演的电影《第八个嫌疑人》中饰演张文海。同年与侯明昊联合主演由钟澍佳执导的电视剧《倩女幽魂》饰演厉竞天。2020年11月7日,出演的由优酷出品的都市女性情感励志剧《致勇敢的你》于西安开机。同年,出演由钟澍佳执导,窦骁,陈都灵,胡军主演年代情感剧《良辰好景知几何》中饰演莫希白。同年出演由国建勇执导,王千源,蓝盈莹,严屹宽主演的涉案剧《宣判》饰演卓建设。剧照
2008年,刘真佑在古装大戏《三国》中扮演司马昭。刘真佑表演松弛具爆发力,由于不断的积累,镜头里的他,显得愈加沉稳,成熟。